ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ ИЗ КЛЕТОЧНОЙ БИОМАССЫ МИКРОВОДОРОСЛИ CHLORELLA VULGARIS И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ КОЛИЧЕСТВА ФОТОКОЛОРИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2020-01-06
Номер журнала: 
1
Год издания: 
2020

Б.О. Роик аспирант, кафедра физиологии и химии им. проф. А.А. Сысоева, Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова E-mail: bogdan.biochem.roik@mail.ru М.М. Наумов д.в.н., профессор, кафедра физиологии и химии им. проф. А.А. Сысоева, Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова E-mail: naumovmm@rambler.ru

Нуклеиновые кислоты хлореллы участвуют в передаче закодированной генетической информации от поколения к поколению микроводоросли, обеспечивая сохранность и долговечность вида. Информация о количестве нуклеиновых кислот, присутствую¬щих в хлорелле, позволит в дальнейшем создать препараты на основе ДНК и РНК в виде натриевых солей. Представлены результаты количественного анализа нуклеиновых кислот в зеленой микроводоросли Chlorella vulgaris (штамм ИФР № С-111). Щелочной и кислотный гидролиз РНК и ДНК из биомассы данного микроорганизма проводился по адаптированному и приспособленному биохимическому методу ШмидтаТангаузера. Разработан и модернизирован эффективный метод фотоколори¬метрического определения количества ДНК и РНК в гидролизате по специфическим цветным реакциям на углеводные мономеры дезоксирибозу и рибозу соответственно, с использованием 96-луночного планшетного фотометра-ридера, применяемого для иммуноферментного (ИФА) скрининга. Определен экспериментально оптимальный светофильтр на 620 нм (оранжевый) для регистрации окрашенных соединений дезоксирибозы и рибозы после цветных реакций специфическими растворами реагентов дифениламина и орцина. Построены соответствующие градуировочные зависимости с коэффициентом линейности не менее r = = 0,999 для количественного определения ДНК и РНК в объеме гидролизатов, что позволило определить количество нуклеи¬новых кислот в навеске биомассы Chlorella vulgaris.

Ключевые слова: 
дезоксирибоза
ДНК и РНК
метод Шмидта-Тангаузера
микроводоросли
нуклеиновые кислоты
рибоза
фотоколориметрия
Chlorella vulgaris

Список литературы: 
  1. Bock C., Krienitz L., Pröschold T. Taxonomic reassessment of the genus Chlorella (Trebouxiophyceae) using molecular signatures (barcodes), including description of seven new species. Fottea. 2011; 11(2):293-312.
  2. Darienko T., Gustavs L., Mudimu O., et al. Chloroidium, a common terrestrial coccoid green alga previously assigned to Chlorella (Trebouxiophyceae, Chlorophyta). Eur. J. Phycol. 2010; 45:79-95.
  3. Роик Б.О., Наумов Н.М., Лукьянов В.А., Наумов М.М. Биохимические показатели и аминокислотный состав кормовой добавки «Альгавет». Материалы Междунар. научно-практич. конф. «Интеграция науки и сельскохозяйственного производства». Ч.1. Курск: КГСХА, 2017. С. 294-296.
  4. Хлорелла – суперводоросль с полезными свойствами для здоровья. [Электронный ресурс]. Дата обращения: 21.09.2019. URL: http://fitfan.ru/nutrition/10258-khlorella-11-super-svojjstv.html.
  5. Huss V.A.R., Scharpf T.K., Kessler E. Deoxyribonucleic-acid reassociation in the taxonomy of the genus Chlorella. V. Chlorella vulgaris, C. luteoviridis, C. minutissima, and C. zofingiensis. Arch. Microbiol. 1989; 152:512-514.
  6. Федянина Л.Н., Беседнова Н.Н., Эпштейн Л.М. и др. Лекарственные препараты и биологически активные добавки к пище на основе нуклеиновых кислот различного происхождения. Тихоокеанский медицинский журнал. 2007; 4:9-12.
  7. Каплина Э.Н. Деринат – природный иммуномодулятор для детей и взрослых. М.: Научная книга, 2005.
  8. Пашук Л.К., Апрышко Г.Н., Трещалина Е.М. Препараты ДНК как потенциальные терапевтические средства. Химико-фармацевтический журнал. 1995; 6:61-64.
  9. Серебряная Н.Б., Новик А.А. ДНК как иммуностимулятор (обзор литературы). Медицинская иммунология. 2001; 3(1):27-34.
  10. Каплина Э.Н. Использование препарата Деринат в различных областях медицины. Материалы 1-й Всеросс. конф. «Использование препарата деринат в различных областях медицины». М., 2000. С. 47.
  11. Воронин С., Гуменюк А., Ханис А., Фёдоров Ю. Натрия нуклеинат – эффективный иммуномодулятор. Животноводство России. Секция Ветеринария. 2015; 7: 21.
  12. Нуклеиновые кислоты, влияние на иммунитет. [Электронный ресурс]. Дата обращения: 21.09.2019. – URL: http://www.blackpantera.ru/useful/health/dictionary/19413.
  13. Нуклеиновые кислоты: методические указания / Сост. В.А. Шадрикова, В.А. Смирнов, Ю.Н. Климочкин. Самара: Самар. гос. техн. ун-т, 2014. 23 с.
  14. Большой практикум «Биохимия». Лабораторные работы: Учеб. пособие / сост. М.Г. Кусакина, В.И. Суворов, Л.А. Чудинова. Пермь: Перм. гос. нац. исслед. ун-т, 2012. 148 с.