МУТАГЕННЫЕ СВОЙСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА НА ОСНОВЕ ТРИДЕКАПЕПТИДА В ТЕСТЕ ЭЙМСА И В ТЕСТЕ ПО УЧЕТУ МИКРОЯДЕР В ЭРИТРОЦИТАХ КРОВИ МЫШЕЙ

DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2018-08-06
Номер журнала: 
8
Год издания: 
2018

А.Х. Шараф токсиколог, группа общей и специфических видов токсичности, Институт экспериментальной фармакологии (Санкт-Петербург) Е-mail: sharaf.ah@doclinika.ru Е.Д. Бондарева руководитель группы биобезопасности, Институт экспериментальной фармакологии (Санкт-Петербург) К.Л. Крышень к.б.н., руководитель отдела токсикологии и микробиологии, Институт экспериментальной фармакологии (Санкт-Петербург) О.Н. Пожарицкая к.фарм.н., зам. директора по новым технологиям, Институт экспериментальной фармакологии (Санкт-Петербург) М.Н. Макарова д.м.н., зам. директора по науке, Институт экспериментальной фармакологии (Санкт-Петербург)

Изучена мутагенная активность лекарственного средства на основе тридекапептида H-Tyr-D-Arg-Phe-Gly-(D-Arg)8-Gly-OH*10HCl в тесте по учету микроядер в эритроцитах крови мышей и в тесте Эймса. Установлено, что тестируемый объект в концентрациях 1000–0,01 мкг/мл не оказал мутагенного действия на штаммы Salmonella typhimurium ТА98, ТА100, ТА1535, ТА1537 при тестировании с метаболической активацией и без нее. Выявлено статистически значимое снижение количества колоний, вплоть до полного их отсутствия, при концентрации исследуемого вещества 1000 мкг/мл, что свидетельствует о цитотоксическом действии субстанции H-TYR-D-ARG-PHE-GLY-(D-ARG)8-GLY-OH*10HCL in vitro. Установлено, что метаболическая активация резко снижает цитотоксические свойства тестируемой субстанции (в варианте теста с метаболической активацией цитотоксические свойства проявляются только на штамме TA98). Высказано предположение, что тестируемый объект повергается метаболизму в ткани печени, что требует дополнительного изучения. В тесте по учету микроядер показано отсутствие мутагенного эффекта субстанции тридекапептида в дозах 1 и 10 мг/кг при однократном и семидневном внутрижелудочном введении.

Ключевые слова: 
мутагенность
анальгетик
тридекапептид
генотоксичность
микроядра
тест Эймса
цитотоксичность

Список литературы: 
  1. Шабанов П.Д. Фармакология лекарственных препаратов пептидной структуры // Психофармакология и биологическая наркология. 2008. Т. 8. С. 2399-2425.
  2. Соловьев В.Б. Нейропептиды: структурно-функциональ-ная классификация // Actucalscience. 2015. № 4. С. 22-35.
  3. Kacprzak M.M., Peinado J.R., Than M.E., Appel J., Henrich S., Lipkind G., Houghten R.A., Bode W., Lindberg I. Inhibition of furin by polyarginine-containing peptides: nanomolar inhibition by nona-D-arginine // J Biol Chem. 2004. V. 279. № 35. Р. 36788-36794.
  4. Khen Eng Ng, Mohd Cairul Iqbal Mohd Amin, corresponding author Haliza Katas, Muhammad Wahab Amjad, Adeel Masood Butt, Prashant Kesharwani, and Arun K. Iyer. pH-Responsive Triblock copolymeric micelles decorated with a cell-penetrating peptide provide efficient doxorubicin delivery // Nanoscale Res. Lett. 2016. № 11. Р. 539.
  5. Yoneda A., Couchman J.R. Regulation of cytoskeletal organization by syndecan transmembrane proteoglycans // Matrix Biol. 2003. V. 22. № 1. Р. 25-33.
  6. Миронов А.Н. Руководство по проведению доклиниче-ских исследований лекарственных средств. Ч. 1. М.: Гриф и К. 2012.
  7. OECD (2014), Test No. 474: Mammalian Erythrocyte Micronucleus Test. OECD Publishing. Paris; doi: 10.1787/9789264224292-en.
  8. International Conference on Harmonisation; guidance on S2(R1) Genotoxicity Testing and Data Interpretation for Pharmaceuticals intended for Human Use; availability // Notice. Fed. Regist. 2012. V. 77. № 110. Р. 33748-33749.
  9. Описание набора Ames MPF 98/100/1535/1537 [Элек-тронный ресурс]. Режим доступа: http://www.xenomet-rix.ch/en/products/details/ames-mpf-and-ames-ii-mutagenicity-assay-systems.html.
  10. Ames B.N., Mc. Cann J., Vamasaki E. Methods for detection carcinogens and mutagens with Salmonella/mammalian microsome mutagenicity test // Mutat. Res. 1975. V. 31. № 6. Р. 347-364; doi: 10.1016/0165-1161(75)90046-1.
  11. Ацапкина А.А., Крышень К.Л., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Применение бактериальных тест-систем для оценки потенциального мутагенного эффекта новых фармацевтических соединений // Международный вестник ветеринарии. 2014. № 2. С. 109-113.
  12. Barnes W., Tuley E., Eisenstadt E. Base-sequence analysis of His+ revertants of the hisG46 missense mutation in Salmonella typhimurium // Environ. Mutagen. 1982. V. 4. № 3. Р. 297-297.
  13. Ames B.N., Lee F.D., Durston W.E. An improved bacterial test system for the detection and classification of mutagens and carcinogens // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1973. № 70. Р. 782-786.
  14. Белицикий Г.А., Худолей В.В. Краткосрочные тесты в системе выявления канцерогенных для человека химических соединений // Вопросы онкологии. 1998. Т. 32. № 4. С. 1-3.
  15. Директива 2010/63/EU Европейского парламента и Совета Европейского Союза от 22.09.2010 г. по охране животных, используемых в научных целях.
  16. Hayashi M., Morita T., Kodama Y., Sofuni T., Ishidate M. (Jr.) The micronucleus assay with mouse peripheral blood reticulocytes using acridine orange-coated slides // Mutat. Res. 1990. V. 245. № 4. Р. 245-249.
  17. Oliveira-Martins C.R., Grisolia C.K. Determination of mi-cronucleus frequency by acridine orange fluorescent staining in peripheral blood reticulocytes of mice treated topically with different lubricant oils and cyclophosphamide // Genetics and Molecular Research. 2007. V. 6. № 3. Р. 566-574.
  18. Thybaud V., Kasper P., Sobol Zh., Elhajouji A., Fellows M., Guerard M., Lynch A.M., Sutter A. and Tanir J.Y. Genotoxicity assessment of peptide/protein-related biotherapeutics: points to consider before testing // Mutagenesis. 2016. № 31. Р. 375–384.
  19. Castellino S., de Castiglione R., Forino R., Galantino M. and Pulci R. Mutagenic contaminants in synthetic peptides obtained by an azide coupling // Mutagenesis. 1991. V. 6. № 3. Р. 185-187.