ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ УДАЛЕНИЯ ВИРУСОВ ПРИ ОЧИСТКЕ ИММУНОГЛОБУЛИНА G МЕТОДОМ ХРОМАТОГРАФИИ

DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2019-09-05
Номер журнала: 
9
Год издания: 
2019

Н.В. Зубкова д.фарм.н., зам. директора по технологиям, Центр разработок и внедрения, АО «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» (Москва) Е-mail: n.v.zubkova@microgen.ru М.М. Кузнецова технолог, цех диагностических препаратов, филиал АО «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» в г. Нижний Новгород «Нижегородское предприятие по производству бактерийных препаратов «ИмБио» (г. Нижний Новгород) Е-mail: m.m.kuznetsova@microgen.ru А.В. Иванов к.фарм.н., вед. науч. сотрудник, научный отдел, филиал АО «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» в г. Пермь «Пермское научно-производственное объединение «Биомед» (г. Пермь) Е-mail: Ivanoffal@yandex.ru Е.В. Филатова к.б.н., нач. научного отдела, филиал АО «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» в г. Нижний Новгород «Нижегородское предприятие по производству бактерийных препаратов «ИмБио» (г. Нижний Новгород) Е-mail: hbsantigen@yandex.ru Е.В. Орлова д.фарм.н., директор филиала АО «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» в г. Пермь «Пермское научно-производственное объединение «Биомед» (г. Пермь) Е-mail: e.v.orlova@microgen.ru А.М. Николаева д.б.н., гл. науч. сотрудник, научный отдел, филиал АО «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» в г. Пермь «Пермское научно-производственное объединение «Биомед» (г. Пермь) Е-mail: a.m.nikolaeva@microgen.ru С.М. Староверов д.х.н., генеральный директор, ЗАО «БиоХимМак СТ» (Москва) Е-mail: info@bcmst.ru В.С. Карасев к.б.н., ст. науч. сотрудник, ЗАО «БиоХимМак СТ» (Москва) E-mail: karasev@bcmst.ru

Введение. Разработан инновационный технологический процесс получения высокоочищенного препарата БиоГам® “Иммуноглобулин человека нормальный, раствор для инфузий,50 мг/мл, 100 мг/мл”, включающий в себя комбинацию методов спиртового фракционирования и хроматогра-фии на ионообменных и гидрофобном носителях и дополнительные стадии инактивации вирусов для достижения надежного уровня безопасно-сти. Цель. Оценить в модельных экспериментах эффективность снижения титра нуклеиновых кислот (НК) вирусов гепатита В (ВГВ), гепатита С (ВГС) и парвовируса В19 (B19V) в процессе хроматографического выделения и очистки иммуноглобулина G из растворов осадков А (фракции II+III по Кону). Материал и методы. Исследования выполнены в модельных экспериментах на трех сериях образцов осадка А, искусственно контаминиро-ванных вируссодержащим материалом с концентрацией НК вирусов ВГВ – (1,77±0,42)*104 МЕ/мл, ВГС – (1,42±0,14)*103 МЕ/мл, В19V – (1,82±0,14)*105 МЕ/мл и подвергнутых хроматографическому разделению в лабораторных условиях на уменьшенной копии технологического процесса. Фактор редукции вирусов определен по изменению вирусной нагрузки в исследуемых фракциях до и после процесса хроматографии. Результаты. Установлено, что процесс хроматографии при выделении иммуноглобулина G из осадка А обеспечивал достоверный и воспроиз-водимый уровень редукции НК вирусов, в том числе до не определяемого методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) уровня, обеспечивая фактор редукции для ВГВ – (3,61±0,11) lg, для В19V – (3,77±0,02) lg, для ВГС – (2,23+0,03) lg. Выводы. Стадия хроматографии, включенная в процесс производства препарата БиоГам®, вносит значимый вклад в обеспечение его вирусной безопасности, при этом эффективность удаления гемотрансмиссивных агентов подтверждена экспериментально.

Ключевые слова: 
иммуноглобулин G
хроматография
обратное масштабирование технологического процесса
вирусная редукция
препараты крови

Список литературы: 
  1. WHO Guidance document on viral inactivation and removal proce-dure intended to assure the viral safety of blood plasma products. WHO Technical Report, Series № 924, Annex 4 (2004). Available at: http//www.who.int/bloodproducts/publication/en/.
  2. Gröner A. Pathogen safety of plasma-derived products - Haemate P/Humate-P. Haemophilia. 2008; 14 (5):54-71. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1365-2516.2008.01852.x.
  3. Velthove K.J., Over J., Abbink K., Janssen M.P. Viral safety of hu-man plasma-derived medicinal products: impact of regulation re-quirements. Transfus. Med. Rev. 2013; 27 (3): 179-183. DOI: https://doi.org/10.1016/j.tmrv.2013.05.002.
  4. Laursen I.A., Blou L., Sullivan J.S., Bang P., Balstrup F., Houen G. Development, manufacturing and characterization of a highly pu-rified, liquid immunoglobulin g preparation from human plasma. Transfus. Med. Hemother. 2014; 41(3): 205-212. DOI: https://doi.org/10.1159/000357982.
  5. Radomski K.U., Lattner G., Schmidt T., Römisch J. Patho-
  6. gen safety of a new intravenous immune globulin 10% liquid. Bio-Drugs. 2017; 31(2): 125-134. DOI: http://dx.doi.org/10.1007/s40259-017-0212-y.
  7. Патент 2467783 (РФ). Способ получения иммуноглобулинов из фракций, которые образуются при фракционировании чело-веческой плазмы крови [Электронный ресурс] / В.С. Карасев, О.П. Бочкова, С.М. Староверов, И.В. Красильников, А.М. Ни-колаева, В.П. Петровских, А.Б. Перевозчиков; заявл. 30.07.2010; опубл. 10.12.2012. Режим доступа: //http://www.findpatent.ru/patent/246/2467783.html
  8. Roberts P.L., Dunkerley C., Walker C. Virus reduction in an intra-venous immunoglobulin by solvent/detergent treat-
  9. ment, ion-exchange chromatography and terminal low pH incuba-tion. Biologicals. 2012; 40(5):345-352. DOI: https://doi.org/10.1016/j.biologicals.2012.04.007
  10. Virus validation studies: the design contribution and inter-pretation of studies validating the inactivation and removal of viruses. CPMP/BWP/268/95 (1996). Available at: https://www.ema.europa.eu/virus-validation-studies-design-contribution-interpretation-studies-validating-inactivation-removal.
  11. Правила проведения исследований биологических лекарствен-ных средств Евразийского экономического союза. Утв. Реше-нием Высшего Евразийского экономического совета от 03.11.2016. Available at: http://docs.cntd.ru/document/456026116.
  12. Правила надлежащей производственной практики.
  13. Утв. приказом №916 Минпромторга России от 14.06.2013. Available at: http://www.consultant.ru/docu-ment/cons_doc_LAW_152004/.