Нажмите на эту строку чтобы перейти к Новостям сайта "Русский врач"

Перейти
на сайт
журнала
"Врач"
Перейти на сайт журнала "Медицинская сестра"
Перейти на сайт журнала "Фармация"
Перейти на сайт журнала "Молекулярная медицина"
Перейти на сайт журнала "Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии"
Журнал включен в российские и международные библиотечные и реферативные базы данных

ВАК (Россия)
РИНЦ (Россия)
Эко-Вектор (Россия)

ПОДХОДЫ К СТАНДАРТИЗАЦИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ЭНДОЛИЗИНА LYSECD7

DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2020-09-01
Скачать статью в PDF
Номер журнала: 
9
Год издания: 
2020

Н.П. Антонова аспирант, науч. сотрудник, Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России (Москва); Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова (Москва) E-mail: northernnatalia@gmail.com Д.В. Васина к.б.н., лаборант-исследователь, Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России (Москва) E-mail: d.v.vasina@gmail.com В.Ю. Балабаньян д.фарм.н., доцент, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова (Москва) E-mail: bal.pharm@mail.ru В.А. Гущин к.б.н., ст. науч. сотрудник, Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России (Москва); Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова (Москва) E-mail: wowaniada@gmail.com

Актуальность. В условиях роста устойчивости бактерий к существующим лекарственным средствам (ЛС) литические ферменты бакте-риофагов, а именно эндолизины, привлекают особенное внимание исследователей как один из перспективных классов антибактериальных средств. Поскольку этот класс ЛС является достаточно новым, существует необходимость разработки подходов к стандартизации фармацевти-ческих субстанций (ФС) на основе эндолизинов для дальнейшего получения новых эффективных антибактериальных препаратов. Цель работы. Разработать подходы к стандартизации ФС на основе рекомбинантного эндолизина LysECD7, обладающего антибактериальным действием в отношении различных представителей грамотрицательных бактерий. Материал и методы. Подлинность и чистоту ФС эндолизина оценивали по ОФС.1.2.1.0023.15 ГФ XIV с помощью денатурирующего электрофо-реза в 16%-ном полиакриламидном геле. Специфическую антибактериальную активность ФС определяли с помощью разработанной методики оценки бактерицидного действия по снижению количества жизнеспособных бактерий культуры тест-штамма Acinetobacter baumannii Ts 50-16. Стерильность ФС устанавливали по ОФС.1.2.4.0003.15 ГФ XIV методом мембранной фильтрации. Содержание бактериальных эндотоксинов выяв-ляли по ОФС.1.2.4.0006.15 ГФ XIV с помощью хромогенного теста по конечной точке. Количественное содержание белка в ФС определяли по ОФС.1.2.3.0012.15 ГФ XIV колориметрическим методом с бицинхониновой кислотой. Результаты. Изложены современные подходы к стандартизации фармацевтической субстанции рекомбинантного фагового литического фер-мента - эндолизина LysECD7. Предложены основные методики контроля качества ФС LysECD7, включающие в себя такие показатели, как «Элек-трофорез в полиакриламидном геле» и «Специфическая активность» для подтверждения подлинности ФС, «Стерильность», «Бактериальные эн-дотоксины» и «Количественное определение». Выводы. Разработаны подходы к стандартизации ФС эндолизина LysECD7, включающие в себя такие показатели как «Подлинность», «Чисто-та» и «Количественное определение», которые могут обеспечить стабильные эффективность и безопасность ФС для дальнейших разработок инновационных антибактериальных ЛС

Ключевые слова: 
эндолизины
LysECD7
грамотрицательные бактерии
фармацевтическая субстанция
стандартизация
анализ качества
Для цитирования: 
Антонова Н.П., Васина Д.В., Балабаньян В.Ю., Гущин В.А. ПОДХОДЫ К СТАНДАРТИЗАЦИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ЭНДОЛИЗИНА LYSECD7 . Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2020; (9): -https://doi.org/10.29296/25877313-2020-09-01

It appears your Web browser is not configured to display PDF files. Download adobe Acrobat или click here to download the PDF file.

Список литературы: 
  1. Oliveira H., São-José C., Azeredo J. Phage-derived pep-tidoglycan degrading enzymes: challenges and future pro-spects for in vivo therapy. Viruses. 2018; 10(6): 292.
  2. Schmelcher M., Donovan D.M., Loessner M.J. Bacterio-phage endolysins as novel antimicrobials. Future Microbiol. 2012; 7(10): 1147–71.
  3. Назаров П.А. Альтернативы антибиотикам: литические ферменты бактериофагов и фаговая терапия. Вестник РГМУ. 2018; 1: 5–15.
  4. Антонова Н.П., Балабаньян В.Ю., Ткачук А.П. Макаров В.В., Гущин В.А. Физико-химические свойства и противомик-робная активность рекомбинантного фаголизина бактериофага kpp10, действующего на Pseudomonas aeruginosa. Вестник РГМУ. 2018; 1: 22–9.
  5. Lood R., Winer B.Y., Pelzek A.J. et al. Novel phage Lysin ca-pable of killing the multidrug-resistant gram-negative bacterium Acinetobacter baumannii in a mouse bacteremia model. Antimicrob. Agents Chemother. 2015; 59(4): 1983–91.
  6. Larpin Y., Oechslin F., Moreillon P. et al. In vitro characteri-zation of PlyE146, a novel phage lysin that targets Gram-negative bacteria. PLoS ONE. 2018; 13(2): e0192507.
  7. Antonova N.P., Vasina D.V., Lendel A.M. et al. Broad bacte-ricidal activity of the Myoviridae bacteriophage lysins LysAm24, LysECD7, and LysSi3 against Gram-negative ESCAPE pathogens. Viruses. 2019; 11(3): e284.
  8. Государственная Фармакопея Российской Федера-ции XIV издания. М. 2018.
  9. Федеральный закон от 12.04.2010 №61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств».