Нажмите на эту строку чтобы перейти к Новостям сайта "Русский врач"

Перейти
на сайт
журнала
"Врач"
Перейти на сайт журнала "Медицинская сестра"
Перейти на сайт журнала "Фармация"
Перейти на сайт журнала "Молекулярная медицина"
Перейти на сайт журнала "Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии"
Журнал включен в российские и международные библиотечные и реферативные базы данных

ВАК (Россия)
РИНЦ (Россия)
Эко-Вектор (Россия)

РАЗРАБОТКА МЕТОДА СЕЛЕКТИВНОЙ ОЦЕНКИ МИКРОБИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕМЕНТА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2021-01-07
Скачать статью в PDF
Номер журнала: 
1
Год издания: 
2021

С.В. Легковой аспирант, Санкт-Петербургский государственный университет E-mail: stanislav.legkovoy@gmail.com Е.С. Умнякова к.б.н., ст. науч. сотрудник, ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины» (Санкт-Петербург) E-mail: umnyakova.es@iemspb.ru М.Н. Берлов к.б.н., ст. науч. сотрудник, ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины» (Санкт-Петербург) E-mail: berlov.mn@iemspb.ru

Актуальность. Способность сыворотки крови ингибировать жизнедеятельность микроорганизмов в первую очередь обуслов¬лена присутствием в ней группы катионных факторов (лизоцим, β-лизин и др.) и белков системы комплемента. Напрямую комплемент способен вызывать лизис только некоторых грамотрицательных бактерий, в то время как катионные факторы пре¬имущественно активны в отношении грамположительных бактерий. Изучение вклада индивидуальных антимикробных ком¬понентов сыворотки и их сочетанного действия в её микробицидность поможет расширить понимание молекулярных механизмов врожденного иммунитета. Цель исследования. Разработка метода селективного истощения сыворотки по катионным факторам с сохранением функциональной активности системы комплемента. Материал и методы. В качестве исходного материала использовали пулированную сыворотку крови здоровых доноров. Истощение сыворотки осуществляли в процессе ее инкубации с суспензией карбоксиметилцеллюлозы. Для поиска оптимальных условий связывания катионных белков и пептидов варьировали либо концентрацию NaCl в пробе, либо объем вносимой суспензии полимера. Удаление катионных факторов из сыворотки оценивали по остаточной ферментативной активности лизоцима, функциональную активность комплемента – по гемолитической активности сыворотки в отношении эритроцитов кролика. Проведено сравнение микробицидностинативной и истощённой сыворотки в отношении грамположительной бактерии Listeria monocytogenes EGD. Результаты. Инкубация сыворотки с равным объемом суспензии карбоксиметилцеллюлозы в присутствии 0,1 M NaCl позволяет эффективно удалять катионные полипептиды, при этом функциональная активность комплемента существенно не меняется. Истощение сыворотки по катионным факторам значительно ослабляет ее антимикробную активность по сравнению с нативной сывороткой. Выводы. Разработан метод, позволяющий избирательно удалять катионные факторы из сыворотки крови. Благодаря этой процедуре становит-ся возможной селективная оценка микробицидной активности комплемента без влияния со стороны антимикробных катионных полипептидов сыворотки
Ключевые слова: 
врожденный иммунитет
система комплемента
лизоцим
β-лизин
Для цитирования: 
Легковой С.В., Умнякова Е.С., Берлов М.Н. РАЗРАБОТКА МЕТОДА СЕЛЕКТИВНОЙ ОЦЕНКИ МИКРОБИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕМЕНТА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА . Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2021; (1): -https://doi.org/10.29296/25877313-2021-01-07

It appears your Web browser is not configured to display PDF files. Download adobe Acrobat или click here to download the PDF file.

Список литературы: 
  1. Merle N.S., Church S.E., Fremeaux-Bacchi V., et al. Complement system. Part I. Molecular mechanisms of activation and regulation.Front. Immunol. 2015; 6: 262.
  2. Ricklin D., Hajishengallis G., Yang K., et al. Complement: a key system for immune surveillance and homeostasis. NatureImmunol. 2010; 11: 785–97.
  3. Кокряков В.Н. Очерки о врожденном иммунитете. СПб: Наука, 2006; 262 с.
  4. Умнякова Е.С., Пашинская Л.Д., Кренев И.А. и др. Заболевания, связанные с дисрегуляцией системы ком-племента, и перспективы их лечения. Медицинский академический журнал. 2018; 18: 7–16.
  5. Biolchi A., De Angelis G., Moschioni M., et al. Multicomponent meningococcal serogroup B vaccination elicits cross-reactive immunity in infants against genetically diverse serogroup C, W and Y invasive disease isolates. Vaccine. 2020; 38: 7542–50.
  6. Liu D., Chen Z., Yuan Y., et al. Innate immune effectors play essential roles in acute respiratory infection caused by Klebsiellapneumonia. J. Immunol. Res. 2020; 2020: 291714.
  7. Chau N., Pérez-Morales D., Elhenawy W., et al. (p)ppGpp-dependent regulation of the nucleotide hydrolase PpnN confers complement resistance in Salmonella enterica serovar Typhimurium. Infect. Immun. 2020; IAI.00639-20.
  8. Berends E.T., Mohan S., Miellet W.R., et al. Contribution of the complement Membrane Attack Complex to the bactericidal activity of human serum. Mol. Immunol. 2015; 65: 328–335.
  9. Ragland S.A., Criss A.K. From bacterial killing to immune modulation: Recent insights into the functions of lysozyme. PLOS Pathog. 2017; 13: e1006512.
  10. Donaldson D.M., Tew J.G. Beta-lysin of platelet origin. Bacteriol. Rev. 1977; 41: 501–513.
  11. Parry R.M. (Jr.), Chandan R.C., Shahani K.M. A rapid and sensitive assay of muramidase. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1965; 119: 384–386.
  12. Umnyakova E.S., Gorbunov N.P., Zhakhov A.V., et al. Modulation of human complement system by antimicrobial peptide arenicin-1 from Arenicola marina. Mar. Drugs. 2018; 16: 480.
  13. Берлов М.Н., Кораблева Е.С., Андреева Ю.В. и др. Лактоферрин из нейтрофилов собаки: выделение, физико-химические и антимикробные свойства. Биохимия. 2007; 72: 551–559.