Нажмите на эту строку чтобы перейти к Новостям сайта "Русский врач"

Перейти
на сайт
журнала
"Врач"
Перейти на сайт журнала "Медицинская сестра"
Перейти на сайт журнала "Фармация"
Перейти на сайт журнала "Молекулярная медицина"
Перейти на сайт журнала "Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии"
Журнал включен в российские и международные библиотечные и реферативные базы данных

ВАК (Россия)
РИНЦ (Россия)
Эко-Вектор (Россия)

ПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ОРИГИНАЛЬНОЙ ГЕНОТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ КОНСТРУКЦИИ ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ НЕРВНОЙ ТКАНИ

DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2023-02-05
Номер журнала: 
2
Год издания: 
2023

М.Н. Карагяур
к.б.н., ст. науч. сотрудник, Институт регенеративной медицины, Медицинский научно-образовательный центр;
факультет фундаментальной медицины, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова (Москва, Россия)
E-mail: m.karagyaur@mail.ru
А.И. Ростовцева
аспирант, факультет фундаментальной медицины,
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова (Москва, Россия)
E-mail: s.rostov94@mail.ru
П.С. Климович
к.б.н., ст. науч. сотрудник, факультет фундаментальной медицины,
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова (Москва, Россия)
E-mail: lex2050@mail.ru
В.Ю. Балабаньян
д.фарм.н., вед. науч. сотрудник, Институт регенеративной медицины, Медицинский научно-образовательный центр;
факультет фундаментальной медицины, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова» (Москва, Россия)
E-mail: bal.pharm@mail.ru
Д.В. Стамбольский
к.б.н., вед. науч. сотрудник, Медицинский научно-образовательный центр,
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова (Москва, Россия)
E-mail: dstambolsky@gmail.com

Травматические повреждения периферических нервов являются одной из самых частых причин стойкой утраты трудоспособности. Проблема регенерации нервных стволов состоит в медленном росте нервных волокон и краткосрочности продукции нейтрофических факторы (NGF, BDNF, NT-3, GDNF и др.), стимулирующих выживание поврежденных нейронов и рост нервных волокон. Естественного регенераторного потенциала в большинстве случаев недостаточно для полноценного восстановления иннервации, что требует проведения заместительной терапии нейротро-фическими факторами. Одним из перспективных терапевтических подходов является применение генотерапевтических конструкций, что позволяет обеспечить продол-жительную локальную продукцию факторов, стимулирующих регенерацию в зоне повреждения. Ранее на основе модифицированной плазмидной конструкции pVax1, одобренной FDA (U.S. Food and Drug Administration), авторами была создана бицистронная генотерапевтическая конструкция pNCure (plasmid for Nerve Cure), кодирующая последовательности кДНК мозгового нейротрофического фактора (BDNF) и активатора плазминоге-на урокиназного типа (uPA), которая продемонстрировала значительную терапевтическую активность на модели травмы периферического нерва у мышей. Генотерапевтические препараты представляют собой новый класс лекарственных средств, требующих особенного подхода к получению, очистке и стандартизации. В русской литературе практически не встречается информации, посвященной вопросам очистки и стандартизации препаратов данного класса, поэтому подробное их освящение стало темой данной публикации. В данной работе рассмотрены вопросы получения генотерапевтической конструкции путем ее наработки в клетках E. coli с последующей мно-гоступенчатой очисткой, а также вопросы оценки подлинности генотерапевтической конструкции (методы ПЦР и УФ-спектрометрии), определе-ния родственных и посторонних примесей, определения pH и количества плазмидной ДНК в субстанции. Результаты проведенного исследования демонстрируют, что предложенные способы получения, очистки и стандартизации плазмидной конструкции позволяют получить искомый гено-терапевтический препарат высокого качества, удовлетворяющий всем требованиям Государственной фармакопии ХIV, предъявляемым для гено-терапевтических препаратов.

Ключевые слова: 
генная терапия
плазмида
мозговой нейротрофический фактор
урокиназный активатор плазминогена
микробиологическое производство
стандартизация
подлинность
бактериальные эндотоксины
Для цитирования: 
Карагяур М.Н., Ростовцева А.И., Климович П.С., Балабаньян В.Ю., Стамбольский Д.В. ПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ОРИГИНАЛЬНОЙ ГЕНОТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ КОНСТРУКЦИИ ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ НЕРВНОЙ ТКАНИ . Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2023; (2): 32-https://doi.org/10.29296/25877313-2023-02-05

Список литературы: 
  1. Rasulić L., Savić A., Vitošević F., et al. Iatrogenic peripheral nerve injuries-surgical treatment and outcome: 10 Years' Experience. World Neurosurg. 2017; 103: 841–851.e6. DOI: 10.1016/j.wneu.2017.04.099.
  2. Björkman M.A., Björkman-Burtscher I.M., Mannfolk P., et al. Re-construction of sciatic nerve after traumatic injury in humans – fac-tors influencing outcome as related to neurobiological knowledge from animal. J Brachial Plex Peripher Nerve Inj. 2012; 7(1): 7. DOI: 10.1186/1749-7221-7-7.
  3. Gordon B. Neurotrophic factors and their receptors in axonal re-generation and functional recovery after peripheral nerve injury. Molecular Neurobiology. 2003; 27(3): 277–323.
  4. Frostick S.P., Yin Q., Kemp G.J. Schwann cells, neurotrophic fac-tors, and peripheral nerve regeneration. Microsurgery. 1998. 18: 397–405.
  5. Gu X., Ding F., Yang Y., et al. Construction of tissue engineered nerve grafts and their application in peripheral nerve regeneration. Prog Neurobiol. 2011; 93: 204–230.
  6. Karagyaur M., Dyikanov D., Makarevich P., et al. Non-viral trans-fer of BDNF and uPA stimulates peripheral nerve regeneration. Bi-omed Pharmacother. 2015; 74: 6370.
  7. Lykissas M.G., Batistatou A.K., Charalabopoulos K.A., et al. The role of neurotrophins in axonal growth, guidance, and regeneration. Curr Neurovasc Res. 2007; 4: 143-151.
  8. Zhang J.Y., Luo X.G., Xian C.J., et al. Endogenous BDNF is re-quired for myelination and regeneration of injured sciatic nerve in rodents. Eur. J. Neurosci. 2000; 12: 41714180.
  9. Karagyaur M., Rostovtseva A., Semina E. et al. A bicistronic plas-mid encoding brain-derived neurotrophic factor and urokinase plasminogen activatorstimulates peripheral nerve regeneration after injury. J Pharm Exp Therapeutics. 2020; 372(3): 248–255. DOI: 10.1124/jpet.119.261594.
  10. Государственная фармакопея Российской Федерации. В 4-х томах. Изд. XIV. М. 2018 (Gosudarstvennaja farmakopeja Ros-sijskoj Federacii. V 4-h tomah. Izd. XIV. M. 2018).