 Перейти
на сайт журнала "Врач" |
 Перейти на сайт журнала "Медицинская сестра"
|
 Перейти на сайт журнала "Фармация"
|
 Перейти на сайт журнала "Молекулярная медицина"
|
 Перейти на сайт журнала "Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии"
|
Журнал включен в российские и международные библиотечные и реферативные базы данных
 ВАК (Россия)
|
 РИНЦ (Россия)
|
 Эко-Вектор (Россия)
|
 |
РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ СТАНДАРТНОГО ОБРАЗЦА ПАНКРЕАТИНА
DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2023-12-03
Номер журнала:
12
Год издания:
2023
Актуальность. Панкреатин – полиферментный лекарственный препарат, обладающий липолитической, амилолитической и протеолитической активностью и назначаемый в качестве заместительной терапии экзокринной недостаточности поджелудочной железы. Современные требова-ния к контролю качества лекарственных средств (ЛС) предполагают использование высокоспецифичных и высокочувствительных методов анализа с применением стандартных образцов (СО). Для аттестации СО панкреатина необходимо установить значение его каталитической актив-ности. Анализ протеолитической активности панкреатина заключается в проведении реакции протеолиза и количественном определении продук-тов реакции. Наиболее часто для этой цели применяются методы, в которых количественное содержание продуктов протеолиза определяют из-мерением оптической плотности раствора по тирозину. Однако значение протеолитической активности, установленное таким образом, носит условный характер, поскольку измеряемая оптическая плотность на самом деле соответствует смеси тирозина и триптофана. Абсолютным мето-дом определения протеолитической активности считается анализ азота фрагментированных пептидов методом Кьельдаля.
Цель исследования – разработка и валидация методики количественного определения протеолитической активности СО панкреатина.
Материал и методы. Объектом исследования являлась фармацевтическая субстанция панкреатина. Протеолитическую активность в образцах субстанции панкреатина определяли после проведения ферментативной реакции путем количественного определения белкового азота методом Къельдаля.
Результаты. В результате проведенного испытания образцов субстанции панкреатина по разработанной методике количественного анализа протеолитической активности получены достоверные результаты, свидетельствующие о специфичности, линейности, правильности и прецизи-онности данной методики в рамках аналитической области 0,0000849–0,0005367 кат/г (от 80 до 120%).
Выводы. В рамках настоящего исследования предложена методика количественного определения протеолитической активности субстанции панкреатина и оценена приемлемость ее использования в контроле качества соответствующего СО.
Ключевые слова:
панкреатин
стандартный образец
количественное определение
протеолитическая активность
метод Къельдаля
валидация.
Для цитирования:
Гегечкори В.И., Шатилина А.А., Щепочкина О.Ю., Раменская Г.В. РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
СТАНДАРТНОГО ОБРАЗЦА ПАНКРЕАТИНА
. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2023; (12): 25-https://doi.org/10.29296/25877313-2023-12-03
Список литературы:
- Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Новая волна; 2020. 1216 с.
- Maev I.V., Kucheryavyy Yu.A., Gubergrits N.B., Bonnacker I., Shelest E.A., Janssen-van Solingen G.P., Domínguez-Muñoz J.E. Differences in In Vitro Properties of Pancreatin Prepa-rations for Pancreatic Exocrine Insufficiency as Marketed in Russia and CIS. Drugs in R&D. 2020; 20(4): 369–376. DOI: 10.1007/s40268-020-00326-z.
- Щепочкина О.Ю., Гегечкори В.И., Прокофьева В.И. и др. Со-временные подходы к разработке стандартных образцов лекар-ственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2020; 54(7): 49–54. DOI: 10.30906/0023-1134-2020-54-7-49-54.
- Фадейкина О.В., Волкова Р.А. Разработка порядка аттестации стандартных образцов биологических лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2017; 51(8): 44–50. DOI: 10.30906/0023-1134-2017-51-8-44-50.
- Волкова Р.А., Фадейкина О.В., Климов В.И. и др. Актуальные вопросы стандартных образцов в сфере обращения биологиче-ских лекарственных средств. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2016; 16(4): 229–236.
- Государственная фармакопея Российской Федерации, издание XIV, том I, ОФС.1.1.0007.18 «Стандартные образцы». [Элек-тронное издание]. Режим доступа: https://femb.ru/re-cord/pharmacopea14. [Дата обращения 5 Марта, 2023].
- Narendra U.M., Ulhas K.P. Quantitative protease assay by substrate-agarose plate method. JMBFS. 2016; 6(2): 791–793. DOI: 10.15414/jmbfs.2016.6.2.791-793.
- Anson M.L., Mirsky A.E. The estimation of trypsin with hemoglobin. J. Gen. Physiol. 1933; 17(2): 151–157. DOI: 10.1085/jgp.17.2.151.
- Anson M.L. The estimation of pepsin, trypsin, papain, and cathepsin with hemoglobin. J. Gen. Physiol. 1938; 22(1): 79–89. DOI: 10.1085/jgp.22.1.79.
- Серба Е.М., Оверченко М.Б., Игнатова Н.И. и др. Разработка национальных стандартов по методам определения активности ферментных препаратов. Пищевая промышленность. 2013; 7: 40–44.
- ГОСТ Р 53974-2010 Ферментные препараты для пищевой про-мышленности. Метод определения протеолитической активно-сти (с Изменением N 1) от 26 ноября 2010. [Электронное изда-ние]. Режим доступа: https://docs.cntd.ru/do-cument/1200084036 [Дата обращения 5 Марта, 2023].
- Государственная фармакопея Российской Федерации, издание XIV, том III, ФС.2.1.0195.18 «Трипсин». [Электронное изда-ние]. Режим доступа: https://femb.ru/re-cord/pharmacopea14. [Да-та обращения 5 Марта, 2023].
- Государственная фармакопея Российской Федерации XIV Из-дание, Том I, ОФС.1.1.0012.15. Валидация аналитических ме-тодик [Электронный издание]. Режим доступа: https://docs.rucml.ru/feml/pharma/v14/vol1/275/ [Дата обра-щения: 21 Марта, 2023].
- The United States Pharmacopeia 35 – National Formulary 30. Monograph: Pancreatin (e-book), 2011.