Перейти
на сайт журнала "Врач" |
Перейти на сайт журнала "Медицинская сестра"
|
Перейти на сайт журнала "Фармация"
|
Перейти на сайт журнала "Молекулярная медицина"
|
Перейти на сайт журнала "Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии"
|
Журнал включен в российские и международные библиотечные и реферативные базы данных
ВАК (Россия)
|
РИНЦ (Россия)
|
Эко-Вектор (Россия)
|
ПОДХОДЫ К СТАНДАРТИЗАЦИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ЭНДОЛИЗИНА LYSECD7
DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2020-09-01
Номер журнала:
9
Год издания:
2020
Актуальность. В условиях роста устойчивости бактерий к существующим лекарственным средствам (ЛС) литические ферменты бакте-риофагов, а именно эндолизины, привлекают особенное внимание исследователей как один из перспективных классов антибактериальных средств. Поскольку этот класс ЛС является достаточно новым, существует необходимость разработки подходов к стандартизации фармацевти-ческих субстанций (ФС) на основе эндолизинов для дальнейшего получения новых эффективных антибактериальных препаратов. Цель работы. Разработать подходы к стандартизации ФС на основе рекомбинантного эндолизина LysECD7, обладающего антибактериальным действием в отношении различных представителей грамотрицательных бактерий. Материал и методы. Подлинность и чистоту ФС эндолизина оценивали по ОФС.1.2.1.0023.15 ГФ XIV с помощью денатурирующего электрофо-реза в 16%-ном полиакриламидном геле. Специфическую антибактериальную активность ФС определяли с помощью разработанной методики оценки бактерицидного действия по снижению количества жизнеспособных бактерий культуры тест-штамма Acinetobacter baumannii Ts 50-16. Стерильность ФС устанавливали по ОФС.1.2.4.0003.15 ГФ XIV методом мембранной фильтрации. Содержание бактериальных эндотоксинов выяв-ляли по ОФС.1.2.4.0006.15 ГФ XIV с помощью хромогенного теста по конечной точке. Количественное содержание белка в ФС определяли по ОФС.1.2.3.0012.15 ГФ XIV колориметрическим методом с бицинхониновой кислотой. Результаты. Изложены современные подходы к стандартизации фармацевтической субстанции рекомбинантного фагового литического фер-мента - эндолизина LysECD7. Предложены основные методики контроля качества ФС LysECD7, включающие в себя такие показатели, как «Элек-трофорез в полиакриламидном геле» и «Специфическая активность» для подтверждения подлинности ФС, «Стерильность», «Бактериальные эн-дотоксины» и «Количественное определение». Выводы. Разработаны подходы к стандартизации ФС эндолизина LysECD7, включающие в себя такие показатели как «Подлинность», «Чисто-та» и «Количественное определение», которые могут обеспечить стабильные эффективность и безопасность ФС для дальнейших разработок инновационных антибактериальных ЛС
Ключевые слова:
эндолизины
LysECD7
грамотрицательные бактерии
фармацевтическая субстанция
стандартизация
анализ качества
Для цитирования:
Антонова Н.П., Васина Д.В., Балабаньян В.Ю., Гущин В.А. ПОДХОДЫ К СТАНДАРТИЗАЦИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ЭНДОЛИЗИНА LYSECD7
. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2020; (9): -https://doi.org/10.29296/25877313-2020-09-01
Список литературы:
- Oliveira H., São-José C., Azeredo J. Phage-derived pep-tidoglycan degrading enzymes: challenges and future pro-spects for in vivo therapy. Viruses. 2018; 10(6): 292.
- Schmelcher M., Donovan D.M., Loessner M.J. Bacterio-phage endolysins as novel antimicrobials. Future Microbiol. 2012; 7(10): 1147–71.
- Назаров П.А. Альтернативы антибиотикам: литические ферменты бактериофагов и фаговая терапия. Вестник РГМУ. 2018; 1: 5–15.
- Антонова Н.П., Балабаньян В.Ю., Ткачук А.П. Макаров В.В., Гущин В.А. Физико-химические свойства и противомик-робная активность рекомбинантного фаголизина бактериофага kpp10, действующего на Pseudomonas aeruginosa. Вестник РГМУ. 2018; 1: 22–9.
- Lood R., Winer B.Y., Pelzek A.J. et al. Novel phage Lysin ca-pable of killing the multidrug-resistant gram-negative bacterium Acinetobacter baumannii in a mouse bacteremia model. Antimicrob. Agents Chemother. 2015; 59(4): 1983–91.
- Larpin Y., Oechslin F., Moreillon P. et al. In vitro characteri-zation of PlyE146, a novel phage lysin that targets Gram-negative bacteria. PLoS ONE. 2018; 13(2): e0192507.
- Antonova N.P., Vasina D.V., Lendel A.M. et al. Broad bacte-ricidal activity of the Myoviridae bacteriophage lysins LysAm24, LysECD7, and LysSi3 against Gram-negative ESCAPE pathogens. Viruses. 2019; 11(3): e284.
- Государственная Фармакопея Российской Федера-ции XIV издания. М. 2018.
- Федеральный закон от 12.04.2010 №61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств».