КОЛЛЕКЦИЯ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР КАК АЛЬТЕРНАТИВНЫЙ ИСТОЧНИК ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2020-02-02
Номер журнала: 
2
Год издания: 
2020

Н.С. Цыбулько к.фарм.н., вед. науч. сотрудник, отдел агробиотехнологии, Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений (Москва) E-mail: ostafevo11@yandex.ru С.Б. Мясникова науч. сотрудник, отдел агробиотехнологии, Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений (Москва) E: mail fatiniya21.66@mail.ru

ФГБНУ ВИЛАР поддерживает коллекцию 16 штаммов клеточных культур девяти видов лекарственных растений: василистник малый (Thalictrum minus L.), маклейя сердцевидная (Macleaya cordata Willd), стефания гладкая (Stephania glabra Roxb), унгерния Виктора (Ungernia victoris Vved.ex Artjuschenko), женьшень (Panax ginseng C. A.Mey), родиола розовая (Rodiola rosea L.), подофилл щитовидный (Podophyllum peltatum L.), копееч-ник забытый (Hedysarum neglectum), макротомия красящая (Macrotomia eychroma Royle Pauls). Представленные культуры содержат широкий спектр биологически активных веществ: алкалоиды (берберин, сангвинарин, хелерубин, стефарин, галантамин); сапонины, фенилпропаноиды, лигнаны (подофилотоксин), гликозиды (мангиферин), шиконин. Цель исследования – стандартизация клеточных культур–продуцентов биологически активных веществ в условиях длительного культивиро-вания. Материал и методы. В процессе культивирования клеточные штаммы поддерживаются в виде суспензионной культуры в питательной среде по прописям Мурасиге–Скуга с добавлением необходимых витаминов и регуляторов роста и в виде каллуса на агаре. Жизнеспособность культур поддерживается на подвесной качалке с частотой 100 оборотов в минуту в темном помещении при температуре 26º С и в термостатах ТС80М2. Для преодоления нестабильности процессов роста и синтеза целевых вторичных метаболитов при длительном культивировании клеточные штаммы поддерживаются в строго контролируемых условиях с соблюдением технологии культивирования – периодическими пересадками и ре-гулярным проведением контроля содержания основных действующих веществ. Качественный и количественный анализ целевых компонентов проводится хроматоспектрофотометрическим методом. Результаты. Установлено длительное сохранение (более 13 лет) продуктивности по клеточной биомассе и биосинтезу берберина (0,100,12%) клеточной культурой василистника. Максимальный синтез алкалоидов сангвинарина и хелерубина (до 0,88% в сумме) клеточная культура ма-клейи сердцевидной сохраняет более 8 лет. Это подтверждает достаточную стабильность полученных штаммов. Отмечено также варьирование уровня максимального накопления целевых метаболитов при культивировании в течение года. Выводы. Полученные результаты показывают наличие сезонного варьирования синтеза алкалоидов в клеточной культуре, что предположи-тельно, можно объяснить генетической памятью клеток

Ключевые слова: 
клеточная культура
василистник малый
маклейя сердцевидная
стефания гладкая
унгерния Виктора
женьшень
родиола розовая
подофилл щитовидный
копеечник забытый

Список литературы: 
  1. Бутенко Р.Г. Культура клеток и растений и биотехнология. М.: Наука. 1986. 285 с.
  2. Вичканова С.А., Ростоцкий Б.К., Рубинчик М.А. и др. Авторское свидетельство 230387 (СССР). Изобретения. 1968. № 34.
  3. Копылова И.Е., Маслова Г.А., Перельсон М.Е. Применение хроматоспектрофотометрического метода для количественного определения сангвиритрина в траве маклейи. ХФЖ. 1980. № 1. С. 58-62.
  4. Стефаглабрина сульфат – оригинальный препарат антихолинэстеразного действия. Авторское свидетельство (СССР) № 315387. 1963.
  5. Кузнецов Ю.Б., Арзамасцев Е.В. Патент СССР № 1713151. 1986.
  6. Щелчкова И.И., Ильинская Т.Н., Кузовков А.Д. Алкалоиды stephania glabra. Химия природных соединений. 1965. № 4. С. 271.
  7. Машковский М.Д., Кругликова-Львова Р.П. К фармакологии нового алкалоида галантамина. Фармакология и токсикология. 1951. Т. 14. С. 27-30.
  8. Урманцева В.В., Гаевская О.А., Смирнов В.А. и др. Особенности культуры клеток Thalictrum minus как про-дуцента алкалоидов. Физиология растений. 2000. Т. 47. № 1. С. 65–72.
  9. Адеишвили. Л.Б. Цитостатическое действие берберина.. Фармацевтический журнал. 1979. № 2. С. 40-44.
  10. Мурадханов Р.Р., Мезенова Т.Д., Коновалов Д.А. Определение подофиллотоксина в молодых побегах можжевельника виргинского (Juniperus virginiana L.). Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2013. № 3. С. 48-51.
  11. Гаммерман Ф.А., Кадаев Г.Н., Яценко–Хмелевский А.А. Лекарственные растения. М.: Высшая школа. 1990. 542 с.
  12. Глызин В.И., Смирнова Л.П., Объедкова Е.Ф., Шемерянкина Т.Б. Патент на способ получения мангиферина RU 2032413.
  13. Максютина Н.П., Комиссаренко И.Ф., Прокопенко А.П., Погодина Л.И., Липкан Г.Н. Растительные лекарственные средства. Киев: Здоровье. 1985. 278 с.
  14. Куркин В.А., Акушская А.С. Определение сапонинов в корнях женьшеня. Фармация. 2012. Т. 60. № 3. С. 18-20.
  15. Дубинец И.Д. Клинико-морфологическоя оценка эффективности тканево-каллаген-хитозановой трансплантации в реконструкции отохирургии: Автореферат дисс. … канд. Мед. наук. Челябинская государственная медицинская академия. 2007.
  16. Heinrich M., Lee Teoh Hooi. Galanthamine from snowdrop - the de-velopment of a modern drug against Alzheimer’s disease from local Cauca-sian knowledge. Journal of Ethnophar-macology. 2004. V. 92. P. 147-162.
  17. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе. М.: ФБК – ПРЕСС. 1999. 160 с.
  18. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. М.: Мир. 2002. 589 с